SpInsights離心洞察第一期: 如何提高密度梯度離心純化的重復性
眾所周知，密度梯度超速離心（DGUC）是基于密度的高分辨分離金標準。為獲得 DGUC分離的最 佳效果，必須精心制備密度梯度液。手工制備密度梯度液，不但耗時且具有挑戰性。正因如此，離心前，通常需要對密度梯度液的質量和分布進行表征，以確保超速離心時樣品得到充分分離。
密度梯度溶液制備
制備密度梯度溶液時，一般按密度遞增或遞減的順序添加溶液。可以直接使用不連續梯度，或者允許其以受控方式擴散，生成連續梯度。通過實踐和有效操作以避免混合，可以制備出符合特定分離要求的優質密度梯度溶液。
密度梯度溶液表征
確認密度梯度溶液具有預期的分布，是確保樣品得到適當分離的重要環節。接著，采取手動或自動移液、從管底吸液等方法對梯度溶液進行細分。離心前后，可以根據溶液原料，通過單獨或組合測量密度、折光率和吸光度（如 UV/Vis）對梯度溶液分布進行表征和優化。
已制備梯度溶液的使用和儲存
投入時間和精力制備、表征密度梯度溶液之后，就可以進行超速離心分離。梯度溶液久置會發生擴散，不受控制的擴散會導致不良或不一致的結果。因此，梯度溶液最 好是制備后盡快使用。或者，梯度溶液經優化后可以在低溫下存放更久。
小結
通過精密操作制備，很容易獲得高質量梯度溶液并對其進行表征，隨后可以通過密度梯度超速離心法進行樣品高分辨率純化。
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