Capto Core填料具有雙層結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，外層是一個(gè)不含配基的、含有小孔的鈍化層；填料內(nèi)部含有辛胺基團(tuán)。Capto Core家族成員目前有兩個(gè)，分別是Capto Core 400和Capto Core 700。填料名稱中的數(shù)字-400和700，分別是支持鈍化層上的小孔的截留分子量大小分別為400 KDa和700 KDa（見圖1）。

當(dāng)使用Capto Core進(jìn)行純化時(shí)，樣品中大于截留分子量的目的物質(zhì)（一般大于20 nm）無(wú)法進(jìn)入Capto Core填料內(nèi)部，而出現(xiàn)在流穿位置；而小于截留分子量的雜質(zhì)（如HCP/HCD/內(nèi)毒素等）可以進(jìn)入填料內(nèi)部，被填料內(nèi)部的配基吸附柱，在層析的CIP階段清洗下來，從而實(shí)現(xiàn)目的物和雜質(zhì)的分離（見圖2）。

工藝開發(fā)常用的層析柱有預(yù)裝柱和自行裝填兩種（見圖3）。預(yù)裝柱的優(yōu)勢(shì)在于：直接使用，無(wú)需裝填，并且柱效有保證，節(jié)省時(shí)間；可以根據(jù)樣品的體積，選擇HiTrap 1 ml（柱高）或者HiScreen 4.7 ml（柱高=10 cm）的預(yù)裝柱。

如果我們希望使用特定柱體積、柱高的層析柱，可以使用散裝填料和空柱子自行裝填一根層析柱。以XK16/20 column裝填Capto Core 700作為PD層析柱為例。一般實(shí)驗(yàn)室級(jí)別的層析柱裝柱方法分為恒流或者恒壓兩種方式，“條條大路通羅馬”，不同的裝柱方式掌握好裝柱參數(shù)均可以裝出質(zhì)量好的層析柱。比如：可以準(zhǔn)備25 ml散裝填料，以H₂O作為裝柱溶液，采用?KTA層析系統(tǒng)的高級(jí)命令-“Constant pressure flow”，設(shè)置delta pressure=0.35 MPa一步恒壓的方式進(jìn)行裝填，標(biāo)記穩(wěn)定后的柱床高度，下柱頭到標(biāo)記刻度下方3-5 mm。

從原理上講，Capto Core填料屬于操作比較簡(jiǎn)單的層析類型。但是不同的項(xiàng)目的結(jié)果仍然有比較大的差異，那是因?yàn)轫?xiàng)目樣品本身的區(qū)別、關(guān)鍵層析參數(shù)的優(yōu)化程度、檢測(cè)的準(zhǔn)確性等均對(duì)層析結(jié)果產(chǎn)生重要影響。從層析流程上進(jìn)行分析，層析柱、樣品準(zhǔn)備、平衡、上樣、清洗幾個(gè)實(shí)驗(yàn)階段對(duì)純度和收率的影響較大，而層析柱的維護(hù)階段，前CIP、后CIP、保存環(huán)節(jié)對(duì)填料的使用壽命至關(guān)重要。（見圖4）

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