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MolPure<sup>?</sup> Mag32 Residual DNA Sample Preparation Kit FA 磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒FA(預(yù)封裝)

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詳細介紹

MolPure® Mag32 Residual DNA Sample Preparation Kit FA適用于生物制品樣本中殘留DNA檢測的前處理。采用獨特的磁珠和精心優(yōu)化的緩沖體系,可最大限度的分離純化樣本中的微量宿主DNA。配合磁珠法自動化提取儀器和移液法自動化儀器使用,可實現(xiàn)核酸的高通量提取。

該前處理試劑盒可與本公司的多種宿主細胞DNA殘留qPCR法)檢測試劑盒配合使用,包括CHO宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41301ES)、HEK293宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41302ES)、Vero宿主細胞殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41303ES)和E.coli殘留DNA檢測試劑盒(Cat#41304ES)。

 

產(chǎn)品組分

類別

組分編號

組分名稱

產(chǎn)品編號/規(guī)格

18462ES32

2×16 T)

18462ES5

6 ×16 T)

Part I

18462-A

蛋白酶K(20 mg/mL)

700 μL/支×1

1 mL/支×2

Part Ⅱ

18462-B

96孔預(yù)裝板

1塊×2

1塊×6

18462-C

8聯(lián)磁棒套

2條/包×2

2條/×6

18462-D

裂解液

4 mL

12 mL

Part Ⅲ

18462-E

糖原

300 μL

900 μL

18462-F

Poly A鉀鹽

200 μL

600 μL

【注】適用機型為杭州奧盛Auto-Pure32A自動核酸提取儀及同類型儀器(加熱槽位為1、6、7、12)。

 

運輸和保存方法

1. Part I組分冰袋運輸,4℃可保存1年,長期保存于-20℃。

2. Part II組分室溫運輸,室溫保存,有效期1年。

3. Part Ⅲ組分干冰運輸,-20℃保存1年。

4. 收到貨后,請檢查Part IPart IIPart Ⅲ3個組分是否齊全,并立即放入對應(yīng)的保存溫度中儲存。

 

注意事項

1. 使用前請詳細閱讀使用說明書,嚴(yán)格按照使用說明書操作,樣本處理建議在超凈臺或生物安全柜中進行。

2. 配合全自動核酸提取儀使用前,需對全自動核酸提取儀進行紫外消毒。使用完畢后,用75%酒精擦拭提取儀內(nèi)部并進行紫外消毒30 min。

3. 注意觀察常溫保存溶液是否有析出或渾濁(尤其冬季室溫為低溫環(huán)境時),可37℃水浴至溶液澄清,避免影響使用效果。

4. 洗脫時可能存在磁珠殘留,吸取樣本時應(yīng)盡量避免吸入磁珠。

5. 處理樣本及加樣時,勤換槍頭,避免交叉污染。

6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

7. 本產(chǎn)品僅作科研用途

 

實驗前準(zhǔn)備

1. 自備設(shè)備:漩渦振蕩器水浴鍋或金屬浴杭州奧盛Auto-Pure32A自動化核酸提取儀或其他品牌全自動化核酸提取儀。

2. 自備耗材10μL-1000μL不等的低吸附濾芯槍頭1.5 mL低吸附離心管

3. 自備試劑:1×PBS緩沖液(pH 7.4,無 Mg 和 Ca 離子)、超純水

【注】:推薦您購買本公司的超純水(Cat#10116ES)

 

使用方法

配套自動化儀器使用,以杭州奧盛Auto-Pure32A自動化核酸提取儀為例(如要配套其他主流品牌自動化儀器使用,程序可向翌圣生物科技(上海)股份有限公司獲取):

一、預(yù)封裝試劑準(zhǔn)備

1. 從試劑盒中取出預(yù)裝板,顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸,輕甩孔板,使試劑及磁珠都集中到孔板底部。小心撕去預(yù)裝板封膜,避免振動,防止液體濺出。

2. 根據(jù)處理樣本數(shù)量,向預(yù)裝板樣品處理孔(第1、7列)加入9 μL糖原和6 μL Poly A鉀鹽。

二、 樣本處理

1. 待測樣本為疫苗等本身含有較高的DNA含量的樣本,可用1×PBS(pH7.4,無Ca和Mg對樣本進行適當(dāng)比例稀釋后提取對樣本進行稀釋是為了保證檢測的準(zhǔn)確性,使樣本的檢測值在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍之內(nèi),通常可考慮進行100倍稀釋)

2. 待測樣本為干粉,可用超純水將樣本稀釋成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。

3. 待測樣本為復(fù)雜背景基質(zhì)的,可根據(jù)需要進行加標(biāo)回收實驗,以確定合適的樣本稀釋倍數(shù)。

4. 100 μL樣本裝于1.5 mL離心管中,加入100 μL裂解液10 μL蛋白酶K,渦旋混勻10 sec

【注】:樣本蛋白濃度0-100 mg/mL,蛋白酶K用量為10 μL樣本蛋白濃度100-200 mg/mL,蛋白酶K用量為20 μL。

5. 60℃孵育20 min,即為預(yù)處理樣本,待用。

三、自動化提取

1. 將預(yù)處理樣本加入樣品處理孔(第1、7列)。

2. 按照提取儀的位置,正確安放上述96孔預(yù)裝板,并放置96深孔磁棒套。

3. 運行如下程序,程序結(jié)束后,將洗脫板轉(zhuǎn)移至新的離心管中,溶液可置于-20℃短期保存,-80℃長期保存。

奧盛Auto-Pure32A的提取儀器的提取程序

步驟

孔位

混合時間(min)

吸磁時間(sec)

等待時間(min)

容積(μL)

混合速度(1-10)

溫度(℃)

混合位置(0-100%)

混合幅度(1-100%)

吸磁位置(0-100%)

吸磁速度(1-10)

移磁珠

3

0.2

60

0

500

5

/

0

80

0

1

結(jié)合

1

15

90

0

600

5

/

0

80

0

1

清洗1

2

1

60

0

500

8

/

0

80

0

1

清洗2

3

1

60

4

500

8

/

0

80

0

1

洗脫

6

8

90

0

100

10

65

0

80

0

1

棄磁珠

3 

0.2

0

0

500

5

/

0

80

0

1

 

HB220518

 

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