1977年，科學(xué)家 Axel Ullrich 和他的同事們提出使用異硫氰酸胍（Guanidine Thiocyanate）用于 RNA 的分離純化，至1990 年，優(yōu)化該方法后，推出商業(yè)化的 TRIzol 試劑。

賽默飛TRIzol試劑是一種即用型試劑，用于在1小時內(nèi)從人類、動物、植物、酵母或細菌來源的細胞和組織樣本中提取高質(zhì)量的總RNA（以及DNA和蛋白質(zhì)），TRIzol試劑在樣本勻漿化時，可以破壞細胞，溶解細胞組分，同時高效的抑制RNA酶的活性，從而維持RNA的完整性。

在樣本進行勻漿化時，加入0.2mL氯仿或者0.1mL BCP，進行RNA提取。

圖1. 操作流程示意圖，詳細步驟如下：

1. 加1mL TRIzol試劑，裂解樣本，室溫孵育5min。

2. 加0.2 mL氯仿或 0.1 mL BCP，振蕩混勻，孵育3min。

3. 在4°C下12000×g離心樣本15min。

4. 取約500μL上清液至新樣本管中。

5. 加等樣本體積的異丙醇，顛倒混勻，在4°C下孵育10min。

6. 在4°C下12000×g離心10min，棄上清。

7. 加1mL 75%乙醇，重懸沉淀，短暫渦旋樣本，在4°C下7500×g離心5min，棄上清液。此步驟重復(fù)一次。

8. 干燥5-10min，加20-50μL RNase-Free水，在55°C的水浴孵育10min。

圖2. Nanodrop檢測RNA的產(chǎn)量和純度

圖3. Agilent 2100測定RNA完整性和計算RIN指標

圖4. 對提取RNA進行RT-qPCR檢測內(nèi)參基因：GAPDH和ACTA₂，說明BCP提取的RNA，與氯仿相比，內(nèi)參基因表達量無顯著差異。

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*促銷至2024年3月31日