特色方案｜桔梗中桔梗皂苷D的測定
桔梗中桔梗皂苷D的測定
SGLC特色方案
摘要
本文建立了桔梗中桔梗皂苷D的HPLC測定方法。參照2020版《中國藥典》色譜條件，采用色譜柱ShimNex CS C18和ShimNex WR C18分析桔梗中桔梗皂苷D，結果顯示，桔梗皂苷D峰形對稱，理論塔板數大于3000，桔梗皂苷D與相鄰雜質峰基線分離，滿足《中國藥典》要求。此方法可為桔梗中桔梗皂苷D的檢測提供參考。
01
實驗部分
1.1 實驗儀器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色譜儀；
純水機：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）
色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01）
ShimNex WR C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-22）；
SHIMSEN Arc Disc HPTFE針式過濾器（P/N：380-00341-05）；
LC-MS認證樣品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液槍：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。
1.2 對照品溶液的制備
取桔梗皂苷D對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，即得。
1.3 供試品溶液的制備
取本品粉末（過二號篩）約2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，稱定重量，超聲處理（功率250 W , 頻率40 kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過；精密量取續濾液25 mL，蒸干，殘渣加水20 mL，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨試液50 mL洗滌，棄去氨液，再用正丁醇飽和的水50 mL洗滌，棄去水液，正丁醇液回收溶劑至干，殘渣加甲醇適量使溶解，轉移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
02
分析條件與實驗結果
1.4 分析條件
柱溫：30℃
檢測器：ELSD-LTⅢ蒸發光散射檢測儀
漂移管溫度：60℃
流速：1.0 mL/min
進樣量：10 μL
流動相：乙腈：水 =25：75
1.5 實驗結果
1.5.1 色譜柱：ShimNex WR C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-22）
按照上述色譜條件（1.4）進行采集，對照品溶液和供試品溶液色譜圖如下：
對照品溶液
供試品溶液
重現性
對照品溶液重現性
供試品溶液重現性
1.5.2 色譜柱：ShimNex CS C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：380-01230-01）
按照上述色譜條件（1.4）進行采集，對照品溶液和供試品溶液色譜圖如下：
對照品溶液
供試品溶液
重現性
對照品溶液重現性
供試品溶液重現性
03
結論
本文建立了桔梗中桔梗皂苷D的HPLC測定方法。參照2020版《中國藥典》色譜條件，采用色譜柱ShimNex CS C18和ShimNex WR C18分析桔梗中桔梗皂苷D，結果顯示，桔梗皂苷D峰形對稱，理論塔板數大于3000，桔梗皂苷D與相鄰雜質峰基線分離，滿足《中國藥典》要求。此方法可為桔梗中桔梗皂苷D的檢測提供參考。
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